Trenntechniken

Zu dieser Verbindungsklasse zählen reine Kohlenwasserstoffe, Lipide, Carotenoide, Tocopherole, etc. Grundsätzlich kann hierunter alles verstanden werden, was sich nicht in Wasser, Methanol oder anderen polaren Lösungsmitteln lösen lässt. Da sich die Löslichkeit nur auf unpolare Lösungsmittel beschränkt, kommen Trenntechniken zum Einsatz, bei denen unpolare Lösungsmitteln verwendet werden.

• Normalphasenchromatographie
• Nicht-wässrige Umkehrphasenchromatographie
• Supercritical Fluid Chromatographie (SFC) (Nachteil: spezielle Anlage notwendig)

Hierzu gehören Verbindungen wie zahlreiche Pharmazeutika, kleine biologische Verbindungen, Essensbestandteile, Aroma- und Duftstoffe, Konservierungsmittel und viele weitere Stoffklassen. Solche Verbindungen lassen sich in Wasser bzw. in Mischungen aus Wasser und einem polaren Lösungsmittel wie Acetonitril oder Methanol lösen. Daher sind diese Verbindungen ideal für die Umkehrphase geeignet. Besitzen die Analyten höhere Polaritäten, können spezielle Umkehrphasen-Säulen eingesetzt werden. Dabei handelt es sich um polar modifizierte Säulen (Polar embedded oder Polar endcapped).

• Umkehrphasenchromatographie 

Zu den hochpolaren bzw. ionischen Verbindungen zählen z.B. organische Säuren, Amine, Kohlenhydrate (Zucker), Nucleobasen und Nucleoside. Bei dieser Art von Verbindungen kann der pH-Wert teilweise eine sehr große Rolle spielen (organische Säuren).

• Hydrohpile Interaktionschromatographie (HILIC)
• Normalphasenchromatographie
• Ionenpaar Umkehrphasenchromatographie
• Umkehrphasenchromatograpie mit polaren Modifizierungen
• Spezielle Technik für organische Säuren: Ionenausschlusschromatographie
• Spezelle Technik für Kohlenhydrate (Zucker): Ligandenaustauschchromatographie

Bei ionischen Verbindungen kann es sich um permanente Ionen oder um ionisierbare Verbindungen handeln. Für ionisierbare Analyten ist die Kontrolle des pH-Wertes entscheidend für die Wahl der Trenntechnik.

• kleine permanente Ionen → Ionenchromatographie
• ionische Verbindungen (auch Säuren/Basen) → Ionenaustauschchromatographie
• Hydrophile Interaktionschromatographie (HILIC)
• Ionenpaar Umkehrphasenchromatographie

Verbindungen mit amphiphilen Eigenschaften sind Analyten, die sowohl hydrophile als auch lipophile Eigenschaften aufweisen. Dies könnte z.B. ein geladener Kopf und ein großer unpolarer Rest sein. Hierzu gehören bspw. Phospholipide und Detergenzien. Solche Verbindungen sind schwer zu analysieren. Bei schwierigen Analyten, die verschiedene Eigenschaften aufweisen, können Mixed Mode Phasen sehr hilfreich sein. Die Wechselwirkung kann dabei z.B. die Umkehrphase und den Ionenaustausch beinhalten und zeigen so einzigartige Selektivitäten.

• Normalphasenchromatographie
• Hydrophile Interaktionschromatographie (HILIC)
• Mixed Mode Phasen

Bei organischen Polymeren handelt es sich um Biopolymere (Proteine, Peptide) oder um synthetische Polymere (Polyethylene, Polystyrol, etc.). Hier spielt wieder das Ziel der Analytik eine wichtige Rolle.

• Trennung nach der Größe: Biopolymere und wasserlösliche Polymer → Gel-Filtrations-Chromatographie (GFC)
• Trennung nach der Größe: wasserunlösliche Polymere → Gel-Permeations-Chromatographie (GPC)
• Trennung nach der Ladung → Ionenaustauschchromatographie
• Trennung durch polare Wechselwirkungen → Hydrophile Interaktionschromatographie (HILIC)
• Trennung durch hydrophobe Wechselwirkungen → Umkehrphasenchromatographie (RP)
• Trennung von Proteinen durch hydrophobe Wechselwirkungen → Hydrophobe Interaktionschromatographie (HIC)

Bei der Trennung von chiralen Verbindungen (Enantiomeren) kann eine achirale Phase mit einem chiralen Zusatz in der mobilen Phase verwendet werden. Jedoch hat sich die Methode mit einer chiralen stationären Phase etabliert und eine Vielzahl an unterschiedlichen chiralen Selektoren ist verfügbar. Da die Auswahl der geeigneten Phase für die Trennung sehr schwierig vorhersagbar ist, empfiehlt sich hier zunächst eine Literaturrecherche bzw. Applikationssuche bei den Herstellern. Ebenfalls werden Screenng-Services von verschiedenen Herstellern angeboten. Hierbei unterstützen wir Sie gerne. Kontaktieren Sie uns!

• Chirale Chromatographie

In der HPLC bedeuten anorganische Verbindungen meist Ionen. Dabei handelt es sich um Ionen wie Li+, Na+, K+, Ca2+, etc. Neben Kationen können auch Anionen analysiert werden wie z.B. Cl-, Br-, CO32-, SO42-, etc.

• Ionenchromatographie