HALO Protein HPLC-Säulen | MZ-Analysentechnik GmbH

HALO Protein-Säulen von AMT (Advanced Material Technology) bestehen aus Core-Shell-Material und bieten 400 Å und 1000 Å Porengröße für einen uneingeschränkten Porenzugang von großen Proteinen. Mit diesen Porengrößen und der Core-Shell-Technologie können ultraschnelle und hochauflösende Trennungen erzielt werden. Die Partikel sind mit einem Durchmesser von 2.7µm und 3.4µm und mit ES-C18-, C4- und Diphenyl-Modifikationen erhältlich.

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Technische Daten

Phase	Modifizierung	Partikelgröße	Porengröße	Endcapping	C-Gehalt	USP	Oberfläche	pH Bereich	Tmax
HALO Protein ES-C18	C18	2.7 µm 3.4 µm	1000 Å 400 Å	+	1.4 %C 1.0 %C	L1	15 m²/g	1.0-8.0	90°C^a 40°C^b
HALO Protein C4	C4	2.7 µm 3.4 µm	1000 Å 400 Å	+	0.6 %C 0.4 %C	L26	15 m²/g	2.0-9.0	90°C^a 40°C^b
HALO Protein Diphenyl	Diphenlmethyl	2.7 µm 3.4 µm	1000 Å 400 Å	+	N/A 1.0 %C	L11	15 m²/g	2.0-9.0	90°C^a 40°C^b

a Low pH; b High pH

Applikationen

Höhere Auflösung mit HALO 400 Å Diphenyl im Vergleich zu FPP 300 Å Diphenyl

HALO 400 Å Diphenyl übertrifft eine FPP 300 Å Diphenyl-Säule durch eine höhere Auflösung und einen 2.7-mal niedrigeren Gegendruck. Die 400 Å Poren ermöglichen einen besseren Zugang zur gebundenen Phase.

TESTBEDINGUNGEN

Säulen:
HALO 400 Å Diphenyl, 3.4 μm, 2.1 x 150 mm
FPP 300 Å Diphenyl, 1.8 μm, 2.1 x 150 mm

Flussrate: 0.2 mL/min
Temperatur: 60 °C
Injektionsvolumen: 2 μL of 2 mg/mL denosumab
Instrument: Shimadzu Nexera
Detektion: PDA bei 220 nm
Mobile Phase A: 88/10/2 Wasser/ACN/n-Propanol + 0.1% DFA
Mobile Phase B: 70/20/10 n-Propanol/ACN/Wasser + 0.1% DFA
Gradient: 18-28% B in 20 min

Hochtemperaturvergleich der HALO 1000 Å-Phasen

Drei gebundene Phasen (C4, ES-C18 und Diphenyl) sind jetzt auf oberflächlich porösen HALO 1000 Å Partikeln verfügbar. Jede Phase bietet eine einzigartige Selektivität für mAbs, wie diese Hochtemperaturtrennung von Trastuzumab zeigt.

TESTBEDINGUNGEN

Säulen:
HALO 1000 Å C4, 2.7 μm, 2.1 x 150 mm
HALO 1000 Å ES-C18, 2.7 μm, 2.1 x 150 mm
HALO 1000 Å Diphenyl, 2.7 μm, 2.1 x 150 mm

Flussrate: 0.4 mL/min
Temperatur: 80 °C
Injektionsvolumen: 2 μL mit 2 mg/mL
trastuzumab in Wasser/0.1% TFA
Instrument: Shimadzu Nexera
Detektion: PDA bei 280 nm
Mobile Phase A: Wasser/0.1% TFA
Mobile Phase B: ACN/0.1% TFA
Gradient:
32-40% B in 16 min (C4 und ES-C18)
32-38% B in 12 min (Diphenyl)

Vergleich von HALO 1000 Å Diphenyl mit dem Konkurrenzprodukt PolyPhenyl bei 40 °C

HALO 1000 Å Diphenyl zeigt eine verbesserte Auflösung, Retention und Peakfläche im Vergleich zu einer Konkurrenzsäule aus 450 Å SPPs mit PolyPhenyl-Phase. Die erhöhte Retention zeigt deutlich den Vorteil des ungehinderten großporigen Zugangs zur gebundenen Phase. Die HALO Diphenyl-Phase kann auch bei 40 °C betrieben werden, ohne dass es zu einem Verlust an Peakfläche kommt.